Molekularne podstawy bakteryjnej patogenezy

fakultatywne

Biochemia 1400-113BCH
Genetyka z inżynierią genetyczną 1400-114GEN
Mikrobiologia 1400-113MIK

Dla studentów Wydziału Biologii wymagane jest zaliczenie zajęć z podstawowej mikrobiologii i biochemii lub genetyki; dla innych - znajomość mikrobiologii, biochemii lub genetyki w stopniu odpowiadającym wiedzy prezentowanej podczas wymienionych wyżej zajęć.

w sali

Celem wykładu jest przekazanie współczesnej wiedzy dotyczącej molekularnych mechanizmów patogenezy bakteryjnych chorób infekcyjnych. Szczególny nacisk jest położony na zjawiska oddziaływania bakteryjnych patogenów z komórkami gospodarza (komórki układu immunologicznego oraz komórki nabłonkowe) i mechanizmów zmian w szlakach transdukcji sygnałów w komórkach eukariotycznych oraz konsekwencji tych procesów. Omówione będą także strategie badania mechanizmów patogenezy ze szczególnym uwzględnieniem współczesnych globalnych analiz (genomika, transkryptomika i proteomika) oraz zjawiska horyzontalnego transferu genów warunkujące pojawianie się wielu groźnych szczepów bakterii patogennych o nowych właściwościach. Podczas zajęć praktycznych studenci zapoznają się z podstawowymi molekularnymi technikami stosowanymi do analizy procesów patogenności.

Wykład:

Terminologia (definicja chorób infekcyjnych, infekcja, kolonizacja, czynniki wirulencji patogeny oportunistyczne, „emerging„ patogeny). Historia bakteriologii, klasyczne i molekularne postulaty Kocha. Ludzka flora fizjologiczna (HMP – Human Microbiome Project). Ewolucja bakterii patogennych - rola HGT, PAI- wyspy patogenności, ewolucja przez redukcję, genomika porównawcza. Mechanizmy indukcji chorób nowotworowych przez bakterie patogenne. Klasyczne i molekularne strategie badania procesów patogenezy. Strategie bakterii patogennych przezwyciężania działania układu odpornościowego (oporność na działanie antybakteryjnych peptydów, mechanizmy zdobywania żelaza, przezwyciężanie działania komplementu i fagocytozy, adhezja, inwazja, obrona przed działaniem przeciwciał). Procesy sekrecji czynników wirulencji. Procesy adhezji patogenów do komórek eukariotycznych oraz macierzy zewnątrzkomórkowej. Konsekwencje procesów adhezji, oddziaływanie patogenów na szlaki przekazywania sygnałów komórek eukariotycznych. Biofilmy. Procesy inwazji komórek gospodarza przez patogenne bakterie – mechanizmy wnikania, strategie przeżycia w wakuoli lub cytozolu. Patogeny wewnątrzkomórkowe (Shigella, Salmonella, Yersinia sp.). Regulacja ekspresji genów kodujących czynniki wirulencji - zmienność fazowa, zmienność antygenowa, zjawisko wyczuwania zagęszczenia, rola małych niekodujących RNA (sRNA) w regulacji ekspresji genów kodujących czynniki wirulencji. Toksyny bakteryjne – struktura, mechanizmy i skutki działania.

Opis ćwiczeń.

Ćwiczenia mają charakter pracy laboratoryjnej w zespołach. Mają na celu zapoznanie studentów z podstawowymi metodami stosowanymi do genetycznej i funkcjonalnej analizy czynników wirulencji oraz współczesnymi metodami diagnostyki i genomotypowania szczepów bakterii chorobotwórczych.

Zajęcia praktyczne będą dotyczyły następujących zagadnień:

1. Identyfikacja bakterii rodzaju Campylobacter w próbach ze środowisk naturalnych,

2. Oznaczanie poziomu przeciwciał IgG anty-Helicobacter w surowicy krwi,

3. Analiza poziomu ekspresji genów kodujących czynniki wirulencji (analiza przy zastosowaniu fuzji transkrypcyjnych i genów reporterowych),

4. Funkcjonalna charakterystyka czynników wirulencji : lokalizacja czynników wirulencji,

5. Analiza genów systemu Dsb odpowiedzialnych za wprowadzanie mostków disiarczkowych

6. Analiza funkcjonalna czynników wirulencji – konstrukcja mutantów – mutageneza, insercyjna, specyficzna wobec miejsca)

7. Analiza immunogenności białek – testy Western blot

8. Zapoznanie studentów z pracą wybranych laboratoriów bakteriologicznych: Pracowni Biologii Molekularnej Narodowego Instytutu Zdrowia (prof. dr hab. M. Gniadkowski) i/lub Zakładu Mikrobiologii Krajowego Referencyjnego Laboratorium Prątka w Instytucie Gruźlicy i Chorób Płuc w Warszawie (prof. dr hab. E. Kopeć-Augustynowicz ) i/lub Pracowni Badań Wielkoskalowych w Zakładzie Genetyki Centrum Onkologii-Instytut (dr hab. M. Mikula)

Literatura:

Biologia molekularna bakterii. 2015. PWN – rozdział 8

Gołąb J. M. Jakóbisiak, W. Lasek. Immunologia. 2002. Wydawnictwo Naukowe PWN

Salyers A.A and D. D. Whitt . 2002. Bacterial pathogenesis. A molecular approach. Second edition. ASM Press. Washington D.C

Wilson BA. et al.2011. Bacterial pathogenesis. A molecular approach. Third edition. ASM Press. Washington D.C

Sambrook J., Russell D.W. 2001. Molecular cloning - a laboratory manual. 3rd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York – wybrane rozdziały

Artykuły przeglądowe z czasopism takich jak np. Nat. Rev. Microbiol.; Curr. Opin. Microbiol.; Trends in Microbiol. FEMS Microbiol. Rev i innych rekomendowane przez wykładowcę

WIEDZA

Wykazuje znajomość aktualnego stanu wiedzy w głównych działach biotechnologii i ma wiedzę dotyczącą: terminologii przyrodniczej w zakresie mikrobiologii i genetyki (w j. polskim i j. angielskim), najnowszych badań, odkryć i zastosowań mikroorganizmów w biotechnologii, medycynie czy biologii molekularnej (K_WO1BT1, K_W03BT2, , K_W12BT2, K_W06BI2)

Wykazuje znajomość podstawowych technik i narzędzi w badaniach zjawisk przyrodniczych, w szczególności procesów bakteryjnej patogenezy (K_W04 Bt1)

Wykazuje znajomość zasad planowania badań, nowoczesnych technik zbierania danych , wykorzystania technicznych i technologicznych aspektów biotechnologii oraz stosowania różnych narzędzi badawczych (K_W05BT1, K_W05BT2)

Ma wiedzę dotyczącą: (i) samodzielnego planowania i prowadzenia prac doświadczalnych, (ii) opracowywania wyników własnych badań w formie nadającej się do dyskusji, oceny lub publikacji oraz (iii) znaczenia pracy doświadczalnej w biotechnologii, w szczególności w profilaktyce i terapii bakteryjnych chorób zakaźnych (K_W08 BT2, K_W01 BT1, K_W10 BI2, K_W12 BI2, K_W13 BI2)

Ma wiedzę na temat komórkowych i molekularnych podstaw funkcjonowania mikroorganizmów i interakcji bakterii patogennych z gospodarzem, w świetle badań nad mechanizmami patogenezy bakterii (K_W01Bt1, K_W03 BI2, K_W05 BI2)

Zna podstawy projektowania i wykonywania modyfikacji genetycznych (wprowadzania mutacji) na materiale biologicznym (K_W01 Bt1, K_W04. K_W05 Bt2)

UMIEJĘTNOŚCI

Wykazuje umiejętność czytania ze zrozumieniem literatury fachowej w języku nowożytnym (angielski) w stopniu umożliwiającym korzystanie ze źródeł elektronicznych i literatury naukowej poświęconej szeroko pojętej genetyce bakterii (K_U02, K_U03 Bt2)

Wykazuje umiejętność poprawnego wnioskowania i interpretowania wyników badań na podstawie danych z różnych źródeł oraz umiejętność krytycznego opracowania wybranego materiału biologicznego (K_U06, K_U07 Bt2)

KOMPETENCJE SPOŁECZNE

Wykazuje zrozumienie zjawisk biologicznych, fizycznych i chemicznych zachodzących w przyrodzie (K_K01 Bt2)

Docenia wagę narzędzi matematycznych i statystycznych stosowanych w biotechnologii (K_K02 Bt2)

Rozumie zasady etycznego postępowania w pracy zawodowej i w życiu (K_K05 Bt )

Wykazuje ostrożność i krytycyzm podczas zdobywania i interpretowania wiedzy z zakresu genetyki mikroorganizmów i jej zastosowania praktycznego (K_K04 Bt2)

Rozumie potrzebę przekazywania społeczeństwu informacji o nowych osiągnięciach biotechnologii i biologii mikroorganizmów oraz potrafi przekazać te informacje w sposób zrozumiały (K_K06 Bt1)

WIEDZA

Wykazuje znajomość aktualnego stanu wiedzy w głównych działach biotechnologii i ma wiedzę dotyczącą: terminologii przyrodniczej w zakresie mikrobiologii i genetyki (w j. polskim i j. angielskim), najnowszych badań, odkryć i zastosowań mikroorganizmów w biotechnologii, medycynie czy biologii molekularnej (K_W02, K_W03 Bt2)

Wykazuje znajomość podstawowych technik i narzędzi w badaniach zjawisk przyrodniczych, w szczególności procesów bakteryjnej patogenezy (K_W04 Bt2)

Wykazuje znajomość zasad planowania badań, nowoczesnych technik zbierania danych , wykorzystania technicznych i technologicznych aspektów biotechnologii oraz stosowania różnych narzędzi badawczych (K_W05 Bt2)

Ma wiedzę dotyczącą: (i) samodzielnego planowania i prowadzenia prac doświadczalnych, (ii) opracowywania wyników własnych badań w formie nadającej się do dyskusji, oceny lub publikacji oraz (iii) znaczenia pracy doświadczalnej w biotechnologii, w szczególności w profilaktyce i terapii bakteryjnych chorób zakaźnych (K_W08 Bt2)

Ma wiedzę na temat komórkowych i molekularnych podstaw funkcjonowania mikroorganizmów i interakcji bakterii patogennych z gospodarzem, ewolucji genomów, profilaktyki i terapii chorób zakaźnych w świetle badań nad mechanizmami patogenezy bakterii (K_W01 Bt1)

Zna podstawy projektowania i wykonywania modyfikacji genetycznych na materiale biologicznym (K_W04. K_W05 Bt2)

UMIEJĘTNOŚCI

Wykazuje umiejętność czytania ze zrozumieniem literatury fachowej w języku nowożytnym (angielski) w stopniu umożliwiającym korzystanie ze źródeł elektronicznych i literatury naukowej poświęconej szeroko pojętej genetyce bakterii (K_U02, K_U03 Bt2)

Wykorzystuje zarówno podstawowe jak i zaawansowane techniki badawcze właściwe dla szeroko pojętej genetyki molekularnej i umożliwiające selekcję i ukierunkowaną modyfikację mikroorganizmów (K_U01 Bt2)

Wykazuje umiejętność poprawnego wnioskowania i interpretowania wyników badań na podstawie danych z różnych źródeł oraz umiejętność krytycznego opracowania wybranego materiału biologicznego (K_U06, K_U07 Bt2)

Przeprowadza proste zadania badawcze lub ekspertyzy pod okiem opiekuna (K_U04 Bt2)

KOMPETENCJE SPOŁECZNE

Wykazuje zrozumienie zjawisk biologicznych, fizycznych i chemicznych zachodzących w przyrodzie (K_K01 Bt2)

Docenia wagę narzędzi matematycznych i statystycznych stosowanych w biotechnologii (K_K02 Bt2)

Rozumie zasady etycznego postępowania w pracy zawodowej i w życiu (K_K05 Bt1 )

Wykazuje ostrożność i krytycyzm podczas zdobywania i interpretowania wiedzy z zakresu genetyki mikroorganizmów i jej zastosowania praktycznego (K_K04 Bt2)

Rozumie potrzebę przekazywania społeczeństwu informacji o nowych osiągnięciach biotechnologii i biologii mikroorganizmów oraz potrafi przekazać te informacje w sposób zrozumiały (K_K06 Bt1)

Warunki zaliczenia zajęć

Zajęcia są zaliczane jeśli student:

1) uczestniczył w co najmniej 85 procentach zajęć

2) pracował na zajęciach w sposób pozwalający pozytywnie ocenić wiedzę, umiejętności i kompetencje społeczne, jakie w toku zajęć uzyskał (opisane w sylabusie jako przedmiotowe efekty kształcenia).

Szczegółowe warunki zaliczenia zajęć:

- zdobycie 51% możliwych do uzyskania punktów ze sprawdzianu pisemnego złożonego z 5-6 pytań otwartych wymagających rozwiązania konkretnych problemów badawczych.

Warunki zaliczenia egzaminu (przedmiotu):

1) Warunkiem dopuszczającym do egzaminu jest zaliczenie ćwiczeń.

2) Szczegółowe warunki zaliczenia egzaminu:

- zdobycie 51% możliwych do uzyskania punktów z egzaminu pisemnego w formie testu wielokrotnego wyboru.

nie dotyczy